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注意,药敏试验方法评价消毒剂不科学!

来源:     阅读次数:5     发布时间:2022-07-25

消毒剂抗菌包括杀菌和抑菌。


消毒剂杀菌评价是指检验和评价各种消毒剂杀灭或清除传播媒介上的微生物效果的试验,要求参照《消毒剂实验室杀菌效果检验方法》(GB/T 38502-2020)标准。


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图1.悬液法-平板计数(左:消毒剂未作用 右:消毒剂作用)


消毒剂抑菌评价是指利用抑菌产品体外抑制细菌或真菌生长效力的试验。参照《消毒技术规范》(2002年版),适用于各种抑菌消毒剂产品实验室抑菌效果的测定。


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图2.抑菌环法(左:消毒剂未作用 右:消毒剂作用)


抗菌药物敏感试验(简称药敏试验)是指对所分离的细菌进行体外抗菌药物的敏感性试验。旨在了解病原微生物对各种抗菌药物(如抗生素)的敏感(或耐受)程度,对指导临床的科学、准确、及时用药,避免疾病的暴发性流行、药物残留及微生物耐药性的增加起着关键性地作用。


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图3.E-test法


表1 试验类型对比

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不同适用对象

针对不同类型消毒剂产品实验室杀菌/抑菌测定方法不一致。悬液定量法适用范围较广,大多数消毒剂均适用,如:季铵盐类、碘类、戊二醛及其复方消毒剂等;载体定量法多用于柠檬酸消毒剂等。


抑菌环法(图2)仅适用于抑菌剂和溶出性抑菌产品鉴定;琼脂稀释法适用于不溶性抑菌产品;营养肉汤稀释法适用于可溶性抑菌产品;滞留抑菌效果测定试验适用于抑菌香皂和沐浴露;洗衣粉抗菌效果测定试验适用于抑菌洗衣粉(剂)、振荡烧瓶试验适用于非溶出性抑菌织物鉴定;浸渍试验适用于溶出性抗菌织物检测;奎因试验适用于非溶出性硬质表面抑菌产品鉴定。


不同作用机理

药敏试验的不同方法无特定药物适用范围。常用方法有:扩散法(Bauer test)、稀释法(dilution test)、E-test法(图3)。然而实际操作中,不同抗菌药物敏感性试验方法灵敏度有较大差异。目前尚无资料对药敏试验中不同试验方法的灵敏度进行选择比较,且很多药品难溶于水,这都为抗菌药物敏感性试验的操作及分析带来了许多不确定因素。


消毒剂的抗菌(含杀菌和抑菌)作用原理是通过以下几种途径与发生接触的细菌作用,从而达到抑制细菌生长进而杀菌的效果。1)金属离子接触反应。当带正电荷的金属离子与带负电荷的生物膜接触时,与蛋白质上巯基、氨基等发生反应,破坏细胞合成酶的活动中心结构,造成微生物死亡或丧失分裂增殖能力。2)有些微量元素能催化活动中心,它们能氧化或使细菌细胞中蛋白质、不饱和脂肪酸、糖苷等发生反应,破坏其正常结构,从而使其死亡或丧失增殖能力。3)细菌在电场引力作用下,细胞壁、细胞膜上负电荷分布不均匀造成物理性破裂,发生“溶菌”现象。4)损坏细胞内容物、酶、蛋白质、核酸。


药敏试验中,抗菌药物对细菌的作用机制是:1)干扰细胞壁合成,如磷霉素、环丝氨酸、万古霉素、青霉素等。2)损伤细菌生物膜。3)抑制细菌蛋白质的合成。4)影响核酸和叶酸代谢,从而影响和终止细菌的生长繁殖。


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不同应用场景

消毒剂杀菌/抑菌试验主要用于消毒剂鉴定和日常监测,用来评价消毒剂对环境、物体表面、手、皮肤、医疗器械等微生物的杀灭/抑制效果。


药敏试验主要用于鉴定某些细菌筛选临床效果最佳的感染性疾病的治疗药物。


药敏试验的局限性

1、在限制性培养条件下,生命周期对于菌群是不确定性的,即增殖细菌群体的组成(细胞大小、基因表达、生理特性等)都不是同质和均衡的。而菌群的异质性对药敏试验的影响未能得到表达。如庆大霉素,菌群在恒速生长期和衰亡期的药物敏感性增强,菌群内异质性增加,减速生长期药物敏感性减弱,菌群内异质性减少。


2、使用抗生素,菌群的生理异质性和抗药性会引起MIC提高。对微生物来说,抗药性是相对的,没有固定的药物系列梯度浓度对微生物生长抑制的“敏感”或“抗药”分界点,因此人为区分“敏感”和“抗药”使得临床用药面临一定困难。


综上,消毒剂产品和抗菌药物由于其应用场景不一致,且试验方法的适用对象、作用机制明显有差异,加之药敏试验有一定的局限性,因此,若使用药敏试验的方法和标准衡量消毒剂作用效果是不准确的,反之亦然。


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